外科手術治療的成敗與手術中的無菌操作有著密切的關系，正確掌握無菌技術是預防切口感染，保證病人安全的關鍵性問題。每位醫護人員都必須充分理解潔凈手術室無菌操作的重要性，才能在手術室各項工作中更好地執行無菌操作。所有參加手術的人員必須認真執行規章，即北京潔凈手術室無菌操作原則。如有違反，應立即糾正。
1.建立一個無菌區
北京潔凈手術室無菌區內所有物品都必須是滅菌的，如果稍有懷疑應立即更換。有下列情況的物品應視為有菌，不能在無菌區內使用：①在非限制區內的滅菌敷料;②無菌包破損或潮濕;③無菌包墜落在地面上;④滅菌有效時間及效果不能肯定;⑤懷疑無菌物已被污染。北京潔凈手術室無菌區的建立應盡量接近使用時間，以減少暴露和污染的機會。
2.無菌手術衣的應用
無菌手術衣的無菌范圍僅限于前身肩平面以下，腰平面以上及袖子。其他部位應視為有菌區。手術人員在穿好手術衣后，前臂不應下垂，應保持在腰平面以上。雙手不應接近面部或交叉及放于腋下，應肘部內收，靠近身體。由于手術衣在腰平面以下視為有菌的，因而不應接觸無菌桌及鋪好的手術臺。手術人員倚墻而立或靠坐在未經滅菌的地方，均是違反北京潔凈手術室無菌原則的。
3.無菌桌的無菌范圍
北京潔凈手術室無菌桌僅桌緣平面以上是無菌，桌緣平面以下，不能長時間保持無菌完整，應視為有菌。手術護士、巡回護士都不應接觸無菌桌緣平面以下的桌布，以建立一個安全地帶。凡墜落于手術臺邊或無菌桌緣平面以下的物品應視為有菌。已墜落下去的皮管、電線、縫線不應再向上提拉或再用。無菌布單被水或血浸濕時，應加蓋或更換新的無菌單。
4.減少空氣污染、保持空氣凈化效果
北京潔凈手術室門窗應關閉，人員進出應走側門，盡量減少在北京潔凈手術間內走動，避免引起陣風。手術進行中應保持肅靜，避免不必要的談話。咳嗽、打噴嚏時應將頭轉離無菌區，避免飛沫污染。為防手術人員滴汗，可于額部加一無茵汗帶。請他人擦汗時，頭應轉向一側，不使紗布纖維落入無菌區。