(一)實驗室安全知識
在生物化學實驗室中,經常與毒性很強、有腐蝕性、易燃燒和具有爆炸性的化學藥品直接接觸,常常使用易碎的玻璃和瓷質器皿以及在煤氣、水、電等高溫電熱設備的環境下進行著緊張而細致的工作,因此,必須十分重視安全工作。
1.進入實驗室開始工作前應了解煤氣總閥門、水閥門及電閘所在處。離開實驗室時,一定要將室內檢查一遍,應將水、電、煤氣的開關關好,門窗鎖好。
2、使用煤氣燈時,應先將火柴點燃,一手執火柴緊靠近燈口,一手慢開煤氣門。不能先開煤氣門,后燃火柴。燈焰大小和火力強弱,應根據實驗的需要來調節。用火時,應做到火著人在,人走火滅。
3.使用電器設備(如烘箱、恒溫水浴、離心機、電爐等)時,嚴防觸電;絕不可用濕手或在眼睛旁視時開關電閘和電器開關。應該用試電筆檢查電器設備是否漏電,凡是漏電的儀器,一律不能使用。
4.使用濃酸、濃堿,必須極為小心地操作,防止濺出。用移液管量取這些試劑時,必須使用橡皮球,絕對不能用口吸取。若不慎濺在實驗臺上或地面,必須及時用濕抹布擦洗干凈。如果觸及皮膚應立即治療。
5.使用可燃物,特別是易燃物(如乙醚、丙酮、乙醇、苯、金屬鈉等)時,應特別小心。不要大量放在桌上,更不要在靠近火焰處。只有在遠離火源時,或將火焰熄滅后,才可大量傾倒易燃液體。低沸點的有機溶劑不準在火上直接加熱,只能在水浴上利用回流冷凝管加熱或蒸餾。
6.如果不慎傾出了相當量的易燃液體,則應按下法處理:
(1)立即關閉室內所有的火源和電加熱器。
(2)關門,開啟小窗及窗戶。
(3)用毛巾或抹布擦拭灑出的液體,并將液體擰到大的容器中,然后再倒入帶塞的玻璃瓶中。
7.用油浴操作時,應小心加熱,不斷用溫度計測量,不要使溫度超過油的燃燒溫度。
8.易燃和易爆炸物質的殘渣(如金屬鈉、白磷、火柴頭)不得倒入污物桶或水槽中,應收集在指定的容器內。
9.廢液,特別是強酸和強堿不能直接倒在水槽中,應先稀釋,然后倒入水槽,再用大量自來水沖洗水槽及下水道。
10.毒物應按實驗室的規定辦理審批手續后領取,使用時嚴格操作,用后妥善處理。
(二)實驗室滅火法
實驗中一旦發生了火災切不可驚慌失措,應保持鎮靜。首先立即切斷室內一切火源和電源。然后根據具體情況正確地進行搶救和滅火。常用的方法有:
1.在可燃液體燃著時,應立即拿開著火區域內的一切可燃物質,關閉通風器,防止擴大燃燒。若著火面積較小,可用抹布、濕布、鐵片或沙土覆蓋,隔絕空氣使之熄滅。但覆蓋時要輕,避免碰壞或打翻盛有易燃溶劑的玻璃器皿,導致更多的溶劑流出而再著火。
2.酒精及他可溶于水的液體著火時,可用水滅火。
3.汽油、乙醚、甲苯等有機溶劑著火時,應用石棉布或砂土撲滅。絕對不能用水,否則反而會擴大燃燒面積。
4.金屬鈉著火時,可把砂子倒在它的上面。
5.導線著火時不能用水及二氧化碳滅火器,應切斷電源或用四氯化碳滅火器。
6.衣服燒著時切忌奔走,可用衣服、大衣等包裹身體或躺在地上滾動,以滅火。
7.發生火災時應注意保護現場。較大的著火事故應立即報警。
(三)實驗室急救
在實驗過程中不慎發生受傷事故,應立即采取適當的急救措施。
1.受玻璃割傷及其他機械損傷:首先必須檢查傷口內有無玻璃或金屬等物碎片,然后用硼酸水洗凈,再擦碘酒或紫藥水,必要時用紗布包扎。若傷口較大或過深而大量出血,應迅速在傷口上部和下部扎緊血管止血,立即到醫院診治。
2.燙傷:一般用濃的(90%~95%)酒精消毒后,涂上苦味酸軟膏。如果傷處紅痛或紅腫(一級灼傷),可用橄欖油或用棉花沾酒精敷蓋傷處;若皮膚起泡(二級灼傷),不要弄破水泡,防止感染;鉻傷處皮膚呈棕色或黑色(三級灼傷),應用干燥而無菌的消毒紗布輕輕包扎好,急送醫院治療。
3.強堿(如氫氧化鈉,氫氧化鉀)、鈉、鉀等觸及皮膚而引起灼傷時,要先用大量自來水沖洗,再用5%乙酸溶液或2%乙酸溶液涂洗。
4.強酸、溴等觸及皮膚而致灼傷時,應立即用大量自來水沖洗,再以5%碳酸氫鈉溶液或5%氫氧化銨溶液洗滌。
5.如酚觸及皮膚引起灼傷,應該用大量的水清洗,并用肥皂和水洗滌,忌用乙醇。
6.若媒氣中毒時,應到室外呼吸新鮮空氣,若嚴重時應立即到醫院診治。
7.水銀容易由呼吸道進入人體,也可以經皮膚直接吸收而引起積累性中毒。嚴重中毒的征象是口中有金屬氣味,呼出氣體也有氣味;流唾液,牙床及嘴唇上有硫化汞的黑色;淋巴腺及唾液腺腫大。若不慎中毒時,應送醫院急救。急性中毒時,通常用碳粉或嘔吐劑徹底洗胃,或者食入蛋白(如1 升牛奶加3 個雞蛋清)或蓖麻油解毒并使之嘔吐。
8.觸電:觸電時可按下述方法之一切斷電路:
(1)關閉電源;
(2)用干木棍使導線與被害者分開;
(3)使被害者和土地分離,急救時急救者必須做好防止觸電的安全措施,手或腳必須絕緣。
(四)實驗室常識
1.挪動干凈玻璃儀器時,勿使手指接觸儀器內部。
2.量瓶是量器,不要用量瓶作盛器。帶有磨口玻璃塞的量瓶等儀器的塞子,不要蓋錯。帶玻璃塞的儀器和玻璃瓶等,如果暫時不使用,要用紙條把瓶塞和瓶口隔開。
3.洗凈的儀器要放在架上或干凈紗布上晾干,不能用抹布擦拭;更不能用抹布擦拭儀器內壁。
4.除微生物實驗操作要求外,不要用棉花代替橡皮塞或木塞堵瓶口或試管口。
5.不要用紙片覆蓋燒杯和錐形瓶等。
6.不要用濾紙稱量藥品,更不能用濾紙作記錄。
7.不要用石蠟封閉精細藥品的瓶口,以免摻混。
8.標簽紙的大小應與容器相稱,或用大小相當的白紙,絕對不能用濾紙。標簽上要寫明物質的名稱、規格和濃度、配制的日期及配制人。標簽應貼在試劑瓶或燒杯的2/3處,試管等細長形容器則貼在上部。
9.使用鉛筆寫標記時,要在玻璃儀器的磨砂玻璃處。如用玻璃蠟筆或水不溶性油漆筆,則寫在玻璃容器的光滑面上。
10.取用試劑和標準溶液后,需立即將瓶塞嚴,放回原處。取出的試劑和標準溶液,如未用盡,切勿倒回瓶內,以免帶入雜質。
11.凡是發生煙霧、有毒氣體和有臭味氣體的實驗,均應在通風櫥內進行。櫥門應緊閉,非必要時不能打開。
12.用實驗動物進行實驗時,不許戲弄動物。進行殺死或解剖等操作,必須按照規定方法進行。絕對不能用動物、手術器械或藥物開玩笑。
13.使用貴重儀器如分析天平、比色計、分光光度計、酸度計、冰凍離心機、層析設備等,應十分重視,加倍愛護。使用前,應熟知使用方法。若有問題,隨時請指導實驗的教師解答。使用時,要嚴格遵守操作規程。發生故障時,應立即關閉儀器,請告知管理人員,不得擅自拆修。
14.一般容量儀器的容積都是在20℃下校準的。使用時如溫度差異在5℃以內.容積改變不大,可以忽略不計。
(五)玻璃儀器的洗滌及各種洗液的配制法
實驗中所使用的玻璃儀器清潔與否,直接影響實驗結果,往往由于儀器的不清潔或被污染而造成較大的實驗誤差,甚至會出現相反的實驗結果。因此,玻璃儀器的洗滌清潔工作是非常重要的。
1.初用玻璃儀器的清洗
新購買的玻璃儀器表面常附著有游離的堿性物質,可先用洗滌靈稀釋液、肥皂水或去污粉等洗刷再用自來水洗凈,然后浸泡在1%~2%鹽酸溶液中過夜(不少于4 小時),再用自來水沖洗,最后用蒸餾水沖洗2~3 次,在80~100℃烘箱內烤干備用。
2.使用過的玻璃儀器的清洗
(1)一般玻璃儀器:如試管、燒杯、錐形瓶等(包括量筒),先用自來水洗刷至無污物;再選用大小合適的毛刷沾取洗滌靈稀釋液或浸入洗滌靈稀釋液內,將器皿內外(特別是內壁)細心刷洗,用自來水沖洗干凈后,蒸餾水沖洗2~3 次,烤干或倒置在清潔處,干后備用。凡洗凈的玻璃器皿,不應在器壁上帶有水珠,否則表示尚未洗干凈,應再按上述方法重新洗滌。若發現內壁有難以去掉的污跡,應分別試用下述各種洗滌劑予以清除,再重新沖洗。
(2)量器:如移液管、滴定管、量瓶等。使用后應立即浸泡于涼水中,勿使物質干涸。工作完畢后用流水沖洗,去附著的試劑、蛋白質等物質,晾干后浸泡在鉻酸洗液中4~6 小時(或過夜),再用自來水充分沖洗、最后用水沖洗2~4 次,風干備用。
(3)其他:具有傳染性樣品的容器,如病毒、傳染病患者的血清等沾污過的容器,應先進行高壓(或其他方法)消毒后再進行清洗。盛過各種有毒藥品,特別是劇毒藥品和放射性同位素等物質的容器,必須經過專門處理,確知沒有殘余毒物存在方可進行清洗。
3.洗滌液的種類和配制方法
(1)鉻酸洗液(重鉻酸鉀-硫酸洗液,簡稱為洗液)廣泛用于玻璃儀器的洗滌。常用的配制方法有下述四種:
① 取100mL 工業濃硫酸置于燒杯內,小心加熱,然后小心慢慢加入5g 重鉻酸鉀粉末,邊加邊攪拌,待全部溶解后冷卻,貯于具玻璃塞的細口瓶內。
② 稱取5g 重鉻酸鉀粉末置于250mL 燒杯中,加水5mL,盡量使其溶解。慢慢加入濃硫酸100mL,隨加隨攪拌。冷卻后貯存備用。
③ 稱取80g 重鉻酸鉀,溶于1000mL 自來水中,慢慢加入工業硫酸100mL(邊加邊用玻璃棒攪動)。
④ 稱取200g 重鉻酸鉀,溶于500mL 自來水中,慢慢加入工業硫酸500mL(邊加邊攪拌)。
(2)濃鹽酸(工業用):可洗去水垢或某些無機鹽沉淀。
(3)5%草酸溶液:用數滴硫酸酸化,可洗去高猛酸鉀的痕跡。
(4)5%~10%磷酸三鈉(Na3PO4·12H2O)溶液:可洗滌油污物。
(5)30%硝酸溶液:洗滌CO2 測定儀器及微量滴管。
(6)5%~10%乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na2)溶液:加熱煮沸可洗脫玻璃儀器內壁的白色沉淀物。
(7)尿素洗滌液:為蛋白質的良好溶劑,適用于洗滌盛蛋白質制劑及血樣的容器。
(8)酒精與濃硝酸混合液:最適合于洗凈滴定管,在滴定管中加入3mL 酒精,然后沿管壁慢慢加入4mL 濃硝酸(比重1.4),蓋住滴定管管口,利用所產生的氧化氮洗凈滴定管。
(9)有機溶劑:如丙酮、乙醇、乙醚等可用于洗去油脂、脂溶
(10)氫氧化鉀的乙醇溶液和含有高錳酸鉀的氫氧化鈉溶液:是兩種